轉(zhuǎn)印膜
轉(zhuǎn)印膜在蛋白質(zhì)、核酸的轉(zhuǎn)移和檢測過程中應(yīng)用廣泛。選擇正確、均一穩(wěn)定的轉(zhuǎn)印膜對達到最佳的實驗結(jié)果起到關(guān)
鍵性的作用。
Western Blot
WB轉(zhuǎn)膜效果影響因素
轉(zhuǎn)印膜的選擇:對蛋白的結(jié)合能力直接影響轉(zhuǎn)印效果;根據(jù)不同的蛋白分子量,選擇合適孔徑的轉(zhuǎn)印膜
確保濾紙、轉(zhuǎn)印膜、凝膠之間緊密接觸無氣泡
轉(zhuǎn)印溫度低,轉(zhuǎn)印效果更佳
轉(zhuǎn)印時間:蛋白分子量大,轉(zhuǎn)印時間延長,但需注意避免轉(zhuǎn)過的問題
轉(zhuǎn)印電壓或電流、轉(zhuǎn)膜緩沖液的配方、pH值等也會影響轉(zhuǎn)印效率
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